目的 分析前列素(prostaglandin, PG)F2α类药物对整个房水动力学系统中各效应蛋白的综合影响,研究PGF2α类药物(尤其是贝美前列素)降眼压作用的分子机理。
方法 分别用10 µg/ml PGF2α类药物连续处理MOLT-3细胞5天后进行qPCR分析;(2)相同剂量药物处理永生性人小梁网(immortalized human trabecular meshwork, iHTM)细胞,用免疫荧光(immunofluorescence,IF)分析纤维连接蛋白(fibronectin, FN)的表达水平和胞外沉积情况;(3)新西兰白兔分别用30 μl卢美根和适利达(qd)滴眼处理4天后用IF分析睫状体水通道蛋白-1(aquaporin-1, AQP1)的改变情况。
结果 (1)拉坦前列素和贝美前列素均能明显提高c-fos和基质金属蛋白酶9 的mRNA水平,同时明显降低基质金属蛋白酶组织抑制剂4的 mRNA水平;(2)贝美前列素能降低FN mRNA水平,拉坦前列素提高了FN mRNA水平。IF表明,贝美前列素明显降低了iHTM细胞内FN蛋白水平,拉坦前列素却提高了FN蛋白水平。对iHTM细胞外FN进行IF分析发现,拉坦前列素和贝美前列素均能减少胞外FN沉积,与拉坦前列素处理细胞相比,贝美前列素处理的细胞外具有相对更少的FN纤维状连接;(3)拉坦前列素和贝美前列素均能明显增加NF-кB p65 mRNA水平,降低IкBα mRNA水平;(4)卢美根明显降低了兔眼睫状体AQP1的蛋白水平,适利达对AQP1蛋白水平的影响不明显。
结论 PGF2α类药物降眼压的作用机理涉及房水动力学的各个环节,包括房水生成、房水外流通路胞外介质的生成及降解;NF-кB信号通路的启动会参与到PGF2α类药物的降IOP机理中;贝美前列素降眼压效果相对较好可能与其对FN合成以及AQP1的调节作用有关。 |