目的 通过观察人视网膜血管内皮细胞(HRECs)低氧模型中Hpa、VEGF受体2(Flk-1)表达变化,探讨在低氧诱导视网膜新生血管形成中Hpa和VEGF的相互关系及Hpa特异性竞争性抑制剂PI-88对VEGF的抑制作用。
方法 用低氧模拟剂氯化钴(CoCl2)造成HRECs低氧模型,分为三组:正常对照组、低氧组(含CoCl2 100μmol/L的培养液培养48小时)和PI-88组(低氧模型中的HRECs用5μg/ml PI-88干预48小时)。免疫荧光染色法观察正常对照组和低氧组HRECs中Hpa、VEGF的表达;Western blot检测三组间Hpa和Flk-1蛋白表达变化。
结果 免疫荧光染色显示低氧组HRECs胞质内Hpa荧光和VEGF荧光均较正常对照组增强,而用PI-88干预48小时后胞质内VEGF荧光较低氧组减弱。Western blot显示:与正常对照组相比,Hpa和Flk-1在低氧组HRECs中的表达均明显升高(P<0.05),而PI-88组Flk-1的表达均比低氧组降低(P<0.05)。
结论 在低氧诱导的HRECs中,HPa与VEGF的表达具有正相关性;PI-88能有效抑制VEGF产生。 |