目的 Eph-Ephrin系统在生理性和病理性血管形成中均发挥重要作用，但Ephrin A4在视网膜新生血管（RNV）性疾病中的作用尚未阐明。本研究将探讨Ephrin A4在氧诱导视网膜病（OIR）中的作用。
方法 制备OIR小鼠模型，使用RT-PCR、Westen Blot和免疫组化检测Ephrin A4在正常小鼠和OIR小鼠视网膜中的表达和细胞定位。P12（生后12天）的OIR小鼠出氧箱后，立即玻璃体腔内注射Eprhin A4特异性shRNA慢病毒(LV-shEphrin A4) 1.5ul（3*108IU/ml），或注射表达非干扰序列的Non-silencing shRNA (LV-NS) 作为阴性对照、avastin为阳性对照。使用异硫氰酸荧光素葡聚糖（FITC-dextran）或伊文氏蓝（Evans blue）心内注射后，行视网膜铺片，评价OIR小鼠中视网膜正常血管再生、RNV形成和渗漏的情况。同时，检测正常培养和低氧培养的猴脉络膜-视网膜血管内皮细胞RF/6A中，Ephrin A4的表达水平及变化。利用Matrige体外血管形成体系，评价Ephrin A4-Fc重组蛋白（RD公司）对RF/6A细胞体外血管形成能力的影响。
结果 Ephrin A4 主要表达于小鼠视网膜神经节细胞层中。P13、P15和P17的OIR小鼠（RNV增殖期）视网膜中，Ephrin A4 mRNA和蛋白的水平显著高于同龄正常小鼠视网膜，但P19和P21的OIR小鼠（RNV消退期）视网膜中Ephrin A4 的表达与同龄正常小鼠无差异。视网膜铺片结果显示：相对于未注射和玻璃体腔内注射LV-NS，注射两种LV-shEphrin A4均可显著地抑制P17 OIR小鼠RNV的形成和渗漏，减少无灌注区面积（P<0.001），但并不影响正常的视网膜血管再生。RF/6A细胞可表达Ephrin A4，并且表达水平在低氧培养后上调。相对于IgG，使用4ug/ml Ephrin A4-Fc重组蛋白刺激，可以显著增强RF/6A的体外血管形成能力（P<0.05）。
结论 Ephrin A4的表达与RNV的进展和消退密切相关，阻断Ephrin A4可以有效地抑制RNV的形成，但是不影响视网膜正常血管再生，这一结果提示Ephrin A4是一个潜在的RNV治疗靶点。