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TUNEL染色观察川芎嗪对氧诱导视网膜病变中视网膜神经细胞凋亡的抑制作用
作者:张熙芳  文章来源:中山大学中山眼科中心 中山大学眼科学国家重点实验室  点击数298  更新时间:2011/9/13  文章录入:毛进  责任编辑:毛进

目的 通过脱氧核苷酸末端转移酶介导缺口末端标记(TUNEL)染色观察氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠模型中视网膜神经上皮层的细胞凋亡,探讨川芎嗪(TMP)对OIR中神经细胞凋亡的影响。
方法 将 48只C57BL/6新生幼鼠随机分为正常对照组(18只)、OIR对照组(18只)及OIR药物组(12只)。正常对照组在正常空气环境中饲养。OIR模型建立方法为将OIR对照组、OIR药物组幼鼠出生后7d置于含氧体积分数(75±3)%的氧气箱中连续生活5 d,至12 d回到正常空气环境中饲养。OIR药物组幼鼠出生后12~16 d腹腔注射TMP(200 mg/kg,1次/d),同时正常对照组、OIR对照组腹腔注射相同体积的生理盐水(含0.1% DMSO)。于12、14、17 d摘除幼鼠眼球作石蜡切片并行TUNEL染色,用Image Pro® Plus图像分析软件检测视网膜神经细胞凋亡数量。
结果 单因素方差分析及Bonferroni检验分析实验结果,P<0.05为差异具有统计学意义。出生后12 d,OIR对照组幼鼠视网膜TUNEL阳性细胞数量为正常对照组的6倍,(t=9.432,F=587.217,P<0.001)。出生后14 d,3组间幼鼠视网膜TUNEL阳性细胞数量均有显著差异(F=587.217,P<0.001);OIR对照组幼鼠视网膜TUNEL阳性细胞数量为正常对照组的28倍(t=49.813,P<0.001);OIR药物组幼鼠视网膜TUNEL阳性细胞数量较OIR对照组减少了82.3%(t=42.434,P<0.001)。出生后17d,3组幼鼠视网膜TUNEL阳性细胞数量无明显差异(t=0.684,P=0.494(OIR对照组vs.正常对照组);t=0.518,P=0.605(OIR对照组vs. OIR药物组);t=0.166,P=0.868(OIR药物组vs. 正常对照组);F=587.217)。
结论 TMP在氧诱导视网膜病变中有保护视网膜神经细胞和抑制凋亡的作用。

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