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应用共轭激光扫描显微镜检测体外培养视网膜体系摄取合成低密度脂蛋白的功能
作者:于永斌,…  文章来源:哈尔滨医科大学第一临床医学院附属眼科医院 150001  点击数2125  更新时间:2004/6/14  文章录入:毛进  责任编辑:毛进
目的:应用共轭激光扫描显微镜检测在体外培养的视网膜组织细胞,摄取合成低密度脂蛋白(sLDL)的功能。从而确定体外培养视网膜组织器官的部分生理功能。为研究体外培养视网膜组织移植供体,观察基因导入和药物代谢等,治疗视网膜疾病提供有力的数据。方法:分离生后3周的鼠(Sprague Dawley)视网膜,将视网膜置于DMEM(Dulbecc's Modified Eagle's Medium)培养液中,培养1小时(37°C,95%O2, 5%CO2)。然后加入由DiO(3,3 dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate)标记的sLDL,在不同的条件下进行体外培养(1-3小时,4°C或37°C)。用2%戊二醛固定后,应用共轭激光扫描显微镜检测在不同培养条件下,体外培养视网膜组织细胞内含有荧光素的强度,来评价体外培养视网膜组织细胞的部分生理功能。结果:通过检测我们观察到在培养条件为37°C,1小时,其视网膜组织细胞内含有荧光素的强度最高,为106.67荧光单位。而在培养条件为4°C,3小时,其视网膜组织细胞内含有荧光素的强度最低,为37.78荧光单位。结论:应用共轭激光扫描显微镜检测体外培养视网膜组织细胞,摄取由荧光素标记的合成低密度脂蛋白,可估价体外培养视网膜组织细胞的部分生理功能。
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