| 目的 观察氧对新生小鼠视网膜血管增生的影响，及对TGFβ-Smad信号通路中关键的分子Samd4基因表达的影响，探讨视网膜新生血管形成的可能分子机制。 方法 两组出生7天的小鼠，一组进入密闭氧箱饲养5天，回到正常环境下继续饲养5天，制造视网膜新生血管形成的模型。另一组始终在正常环境下饲养。出生第17天时处死两组小鼠，摘取眼球固定后切片，行HE染色计数突破内界膜的内皮细胞数，用原位杂交和免疫组化分别检测小鼠视网膜组织Smad4 mRNA及蛋白表达情况。小鼠Smad4 mRNA探针序列：5’-Bio-GGT GGC GTT AGA CTC TGC CGG GGC TAA CAG-3’（1035-1064bp）； Smad4多克隆抗体稀释度1：100。 结果 给氧组平均每个切面突破视网膜内界膜的内皮细胞数为22个，正常对照组少见，两者相比差异有极显著意义（P<0.01）；免疫组化检测显示视网膜细胞胞浆Smad4蛋白表达明显增加，计算机扫描图象分析其平均灰度值为22.3±8.4（正常组8.1±3.2，P<0.05）；原位杂交检测表明新生血管内皮细胞Smad4 mRNA表达增加（P<0.05）。 结论 氧致小鼠视网膜新生血管形成，伴随有内皮细胞Smad4蛋白表达增加，说明视网膜新生血管的发生与TGFβ-Smad信号通路有关。
关键词 摘要 目的 观察氧对新生小鼠视网膜血管增生的影响，及对TGFβ-Smad信号通路中关键的分子Samd4基因表达的影响，探讨视网膜新生血管形成的可能分子机制。 方法 两组出生7天的小鼠，一组进入密闭氧箱饲养5天，回到正常环境下继续饲养5天，制造视网膜新生血管形成的模型。另一组始终在正常环境下饲养。出生第17天时处死两组小鼠，摘取眼球固定后切片，行HE染色计数突破内界膜的内皮细胞数，用原位杂交和免疫组化分别检测小鼠视网膜组织Smad4 mRNA及蛋白表达情况。小鼠Smad4 mRNA探针序列：5’-Bio-GGT GGC GTT AGA CTC TGC CGG GGC TAA CAG-3’（1035-1064bp）； Smad4多克隆抗体稀释度1：100。 结果 给氧组平均每个切面突破视网膜内界膜的内皮细胞数为22个，正常对照组少见，两者相比差异有极显著意义（P<0.01）；免疫组化检测显示视网膜细胞胞浆Smad4蛋白表达明显增加，计算机扫描图象分析其平均灰度值为22.3±8.4（正常组8.1±3.2，P<0.05）；原位杂交检测表明新生血管内皮细胞Smad4 mRNA表达增加（P<0.05）。 结论 氧致小鼠视网膜新生血管形成，伴随有内皮细胞Smad4蛋白表达增加，说明视网膜新生血管的发生与TGFβ-Smad信号通路有关。 |
