| 目的：研究小鸡形觉剥夺性近视恢复眼（RFDM）后极部巩膜基质金属蛋白酶2（MMP-2）基因表达以揭示FDM形成的可能机制。方法：1 d龄来亨雏鸡随机分为形觉剥夺性近视眼（FDM）组、RFDM组、自身对照组、正常对照组。FDM组小鸡以半透明塑料眼罩分别单眼遮盖4、7、14、21、30 d以制备FDM动物模型；当遮盖7、21 d时从FDM 7、21 d组中随机选取小鸡分别去遮盖1、4 d以制备RFDM动物模型；上述实验小鸡对侧眼作为各组自身对照眼；同时随机选取同龄、非遮盖小鸡作为各组的正常对照组。上述各实验组每组小鸡15只。于各预定实验时间去头法处死小鸡，取后极部巩膜，采用明胶酶谱法、逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）一步法、免疫组化法分别检测上述各组小鸡后极部巩膜明胶酶活性、MMP-2 mRNA及蛋白质表达。结果：各FDM组后极部巩膜MMP-2酶活性（约62 kDa）与mRNA水平显著增高，且呈明显时间依赖性，与相应自身对照组、正常对照组比较差别均有统计学意义（P<0.01）；遮盖7 d后去遮盖1 d 后极部巩膜MMP-2酶活性、mRNA表达明显下调，去遮盖4 d后恢复至其正常对照组、自身对照组水平（P>0.05）；遮盖21 d后去遮盖1 d后极部巩膜MMP-2酶活性、mRNA表达亦下调，去遮盖4 d后尽管显著降低，但仍明显高于其正常对照组、自身对照组水平（P<0.01）。免疫组化结果与上述改变基本一致，正常对照组、自身对照组后极部巩膜仅少量成纤维细胞胞浆、软骨细胞软骨囊与细胞膜呈现MMP-2阳性染色；FDM组阳性染色细胞明显增多，尤其以双核细胞、不规则细胞染色最明显，同时部分细胞外间质（ECM）亦出现阳性表达；而遮盖7 d后去遮盖4 d组与其正常对照组、自身对照组基本相似，遮盖21 d后去遮盖4 d组MMP-2阳性染色虽然较遮盖21 d组减少，但仍较自身对照组、正常对照组明显，小部分ECM亦可见阳性表达颗粒。结论：形觉剥夺可明显促进小鸡后极部巩膜MMP-2酶活性、mRNA及蛋白质表达，去遮盖后上述改变可得到部分或全部逆转。 |
