目的 通过P65质粒及圈套核苷酸的转染,研究NF-κB对小梁细胞TIGR基因表达调控的影响。 方法 取原代培养的小梁细胞随机分为5组:正常对照组、pRSV-RelA质粒组、空质粒对照组、NF-κB圈套核苷酸组、随机圈套对照组。细胞转染后RT-PCR法、蛋白免疫印迹法检测小梁细胞TIGR表达。 结果 P65质粒转染24小时后,小梁细胞TIGR基因 mRNA的表达值(与GAPDH的比值)(0.593±0.058)低于正常对照组(0.882±0.022)及空质粒对照组(0.872±0.049),相差显著,P<0.05;小梁细胞TIGR蛋白的表达值(与β-actin的比值)(1.09±0.04)低于正常对照组(1.27±0.04)及空质粒对照组(1.34±0.008),相差显著,P<0.05。NF-κB圈套核苷酸转染24小时后,小梁细胞TIGR基因mRNA的表达值(1.1±0.067)高于正常对照组(0.882±0.022)及随机圈套对照组(0.851±0.026),相差显著,P<0.05;小梁细胞TIGR蛋白的表达值(1.81±0.10)显著高于正常对照组(1.27±0.04)及随机圈套对照组(1.31±0.07),P<0.05。 结论 P65高表达抑制小梁细胞TIGR基因mRNA及蛋白质的表达,NF-κB圈套核苷酸促进小梁细胞TIGR基因mRNA及蛋白质的表达,说明NF-κB具有调控TIGR基因表达的功能。NF-κB圈套核苷酸促进小梁细胞TIGR基因的表达,提示激素性青光眼小梁网TIGR蛋白增高可能与NF-κB的过度抑制有关。 |