目的 初步探讨炎性因子IL-1β在角膜上皮损伤修复中的作用及其可能的作用机制。 方法 使用人角膜上皮细胞系HCEC。在细胞生长至80-90%融合时,使用10ng/ml IL-1β及不同浓度过氧化氢预孵育1小时,然后采用划痕法制作细胞损伤模型,观察损伤24小时后上述培养条件下细胞迁移情况。通过在培养基中添加抗氧化剂重复细胞迁移实验,同时对细胞行活性氧ROS检测和H2O2 sensor标记染色,使用激光共聚焦显微镜观察细胞内荧光变化,酶标仪检测分析细胞内ROS荧光强度。 结果 IL-1β能够显著促进人角膜上皮细胞的迁移,其促迁移效应与低浓度过氧化氢类似。抗氧化剂能够不同程度的抑制IL-1β对细胞迁移的促进作用,其细胞迁移率均低于IL-1β组,但仍高于对照组。对各组细胞进行ROS染色,共聚焦及酶标仪结果均显示IL-1β能够使细胞内活性氧产物增加,而使用抗氧化剂能够降低细胞内ROS水平;进一步将细胞行H2O2 sensor标记发现,IL-1β组划痕处细胞荧光较强,提示损伤处有过氧化氢产生;而添加抗氧化剂后,划痕处细胞荧光强度相应减弱,提示IL-1β促进迁移效应与过氧化氢有关。 结论 炎性因子IL-1β通过刺激损伤处细胞合成低浓度过氧化氢,从而促进损伤处细胞的迁移,有利于损伤创面的愈合。 |