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人视网膜色素上皮细胞吞噬过程中Ca2+浓度改变的研究
作者:安  刚  …  文章来源:中国医科大学附属第一医院眼科 110001  点击数1707  更新时间:2004/6/15  文章录入:毛进  责任编辑:毛进
目的:通过采取体外培养人视网膜色素上皮细胞(RPE),建立RPE细胞吞噬模型 (吞噬脱落的视细胞外节膜盘(ROS)为特异性吞噬;吞噬色素颗粒为非特异性吞噬),检测人视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelium,HRPE)细胞特异性及非特异性吞噬过程中Ca2+浓度变化,明确Ca2+在HRPE的吞噬功能中所起的作用。 方法:用1×107 ml-1视杆细胞外节膜盘(rod outer segments,ROS)及色素颗粒于37℃孵育培养的正常HRPE细胞,在孵育的不同时间(5min—24h)终止吞噬反应。用双重荧光标记法检测HRPE细胞吞噬动力学。用荧光显微镜Fura-3荧光负荷技术联合冷CCD计算机成像分析系统检测相应时间点的HRPE细胞特异性及非特异性吞噬时的Ca2+浓度。 结果:1,特异性吞噬的启动明显早于非特异性吞噬。15minROS结合于RPE细胞表面,1.5h色素颗粒才结合于RPE细胞表面2,特异性吞噬组(ROS组):细胞内钙离子在15min出现了一个突然升高的峰,并在吞噬过程中一直维持高峰。经统计学检验与静息状态下的钙离子浓度有明显差异(P<0.05)。3,非特异性吞噬组(色素颗粒组):在非特异性吞噬过程中细胞胞浆内钙离子未有明显变化,经统计学检验与静息状态下的钙离子浓度无明显差异(P>0.05)。 结论:HRPE细胞特异性吞噬过程中结合及吞入的启动早于非特异性吞噬。Ca2+参与特异性吞噬过程,对吞入过程的维持十分重要,但不参与HRPE细胞非特异性吞噬的直接调节。说明特异性吞噬与非特异性吞噬在信号传导方面有着明显的不同。 关键词 RPE 细胞吞噬 Ca2+浓度
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