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人视网膜色素上皮细胞吞噬过程中cAMP及PKC的改变
作者:孙昱昭  …  文章来源:中国医科大学附属第一医院眼科 110001  点击数2486  更新时间:2004/6/15  文章录入:毛进  责任编辑:毛进
目的 通过检测人视网膜色素上皮(HRPE)细胞特异性及非特异性吞噬过程中环磷酸腺苷(cAMP)浓度及蛋白激酶C(PKC)活性的变化,明确cAMP及PKC在HRPE的吞噬功能中所起的作用。方法 用1×107 个/ml视杆细胞外节膜盘(ROS)及乳胶微球(LB)于37℃孵育培养的正常HRPE细胞,在孵育的不同时间(5 min~48 h)终止吞噬反应。用双重荧光标记法检测HRPE细胞吞噬动力学。用扫描及透射电镜证明HRPE细胞对LB及ROS结合与吞噬。分别用125I-cAMP放射免疫试剂盒及液闪记数γ-32P放射活性法检测相应时间点的HRPE细胞特异性及非特异性吞噬时的cAMP浓度及PKC活性。 结果 HRPE细胞特异性吞噬过程中,孵育15 min时ROS结合于HRPE细胞表面,此时cAMP浓度开始降低;胞浆及胞膜PKC活性的降低早于cAMP,发生在孵育5min时,但二者均在孵育24h达到最低值。在非特异性吞噬过程中,HRPE细胞结合LB发生在孵育90 min,在孵育的12h内cAMP浓度无明显变化(P>0.05),12~48 h cAMP浓度降低;胞浆及胞膜PKC活性在孵育的5min—48h时间内,与对照组比较均无明显差异(P>0.05)。结论 cAMP及PKC对HRPE细胞特异性吞噬吞入过程的维持十分重要,但不参与非特异性吞噬的直接调节。并且,HRPE细胞特异性吞噬过程伴随着cAMP浓度及PKC活性的降低。 关键词 视网膜色素上皮细胞 吞噬 环磷酸腺苷 蛋白激酶C
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