| 目的 探讨兔角膜缘干细胞的体外分离培养方法及其作为眼表基因治疗靶细胞的可行性。方法 将兔角膜缘组织用DispaseⅡ消化后，至于铺有Ⅳ型胶原的培养板内培养。用角蛋白3（K3）、角蛋白19（K19）、和Ki-67细胞免疫组化染色方法对培养的细胞进行鉴定。用逆转录病毒载体介导，绿色荧光蛋白基因（EGFP）基因为标记基因，转染培养的细胞，荧光显微镜下观察。结果 培养的兔角膜缘干细胞细胞体积较小，呈不规则三角形，排列紧密，核/浆比例约为1:1。免疫组化染色结果显示培养的细胞角蛋白19（K19）和Ki-67表达阳性，角蛋白3（K3）呈阴性表达。EGFP转染的细胞在荧光显微镜下呈强绿色荧光。结论 本研究初步实现角膜缘干细胞的体外分离培养及基因转染，并证实了角膜缘干细胞可以作为基因治疗的靶细胞用于眼表疾病的治疗。
【关键词】 角膜缘干细胞 基因治疗 逆转录病毒载体 转染 |
