| 目的 探讨兔视网膜节细胞逆行示踪标记的方法。方法11只2周龄的中国黑色家兔，体表定位，用微量注射器，在6只黑兔的双上丘缓慢注入3%荧光金5μl，5只黑兔双上丘注入2%辣根过氧化物酶5μl。1只荧光金标记的黑兔，马上处死，打开颅腔，观察标记点是否仅限于上丘。10只黑兔标记注射后48h-72h，过量麻醉处死，取兔视网膜及上丘组织行冰冻切片、视网膜铺片、视网膜节细胞培养。荧光金标记者，用荧光显微镜观察。辣根过氧化物酶标记者，用H2O2-DAB染色，在显微镜下观察。结果 标记注射后即刻，肉眼观察见荧光染料局限于上丘核团内，上丘组织的冰冻切片，显微镜下见辣根过氧化物酶仅限于上丘内的注射区。视网膜切片和铺片上，可见荧光呈聚集性地分布于视网膜节细胞中。切片上，辣根过氧化物酶标记的视网膜节细胞显示不佳，但视神经显示清楚。铺片上，辣根过氧化物酶标记的视网膜节细胞显示清楚。培养中，视网膜节细胞的胞体及锥突均显荧光，接种后28天仍可见荧光。辣根过氧化物酶标记的视网膜节细胞生长不良。结论 采用体表定位的方法，可准确的将神经示踪物标记注射到兔的上丘。视神经轴浆流和铺片上视网膜节细胞的示踪标记中，辣根过氧化物酶优于荧光金。切片上和培养的视网膜节细胞的踪标记，荧光金优于辣根过氧化物酶。 |
