目的 研究体外培养的人角膜缘微环境细胞（limbal niche cell, LNC）分化为多潜能间质干细胞（mesenchymal stem cells，MSC）的特性。
方法 采用胶原酶A直接消化法分离培养角膜缘微环境细胞，分别采用微环境细胞培养条件（Matrigel 包被塑料培养板，ESCM +LIF + bFGF）及间质干细胞培养条件（塑料培养板，DMEM+10% FBS）进行培养。应用实时定量RT-PCR、免疫荧光染色共焦显微镜、克隆形成单位成纤维细胞实验（CFU-F）及脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞分化实验比较其分化为多潜能间质干细胞的能力。采用三维干细胞培养模型比较其体外支持角膜缘干细胞（limbal epithelial stem/progenitor cells，LEPC）的功能。
结果 与采用间质干细胞条件培养的细胞相比，采用角膜缘微环境细胞条件培养的人角膜缘微环境细胞表达更高水平的血管周细胞及间质干细胞标志抗原，具有更高的CFU-F形成效率（P﹤0.05）以及分化为脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞能力。在三维培养模型中，前者较后者支持人角膜缘干细胞表达p63a水平升高而CK12水平下降。
结论 体外培养的人角膜缘微环境细胞可分化为多潜能间质干细胞，微环境细胞培养条件是维持其血管周细胞特性进而分化为多潜能间质干细胞的必要条件。 |
