目的 对中国一常染色体显性遗传先天性COPPOCK白内障大家系进行致病基因的定位与候选基因突变检测。
方法 采集家系成员外周静脉血，提取基因组DNA。选用ABI公司提供的约400个遗传标记物进行基因扫描。基因扫描分初步扫描和精细扫描两步进行。首先对已报道的先天性白内障候选区域进行初步扫描，之后在阳性区域内进行精细扫描。数据经连锁分析，初步确定致病基因所在染色体区域。在阳性区域内选取更高密度的荧光标记物进行精细扫描，并进行单体型分析。候选基因直接测序检测基因突变。
结果 两点间连锁分析在微卫星标记D13S175处获得最大对数优势计分（LOD）值Zmax=6.82（θmax=0.00）。精细定位和单体型分析将致病基因定位于微卫星标记D13S1316和D13S1275之间，遗传距离约6.99厘摩（cM），染色体位置为13q12.11。候选基因直接测序，发现GJA3基因的第1外显子第427碱基一个G->A的点突变，密码子GGG->AGG，导致多肽编码序列的第143位甘氨酸变为精氨酸（G143R，或Gly143Arg）。家系所有白内障患者都具有相同的点突变，而家系中的正常人和100名正常对照未发现这个突变，排除了多态性的可能。确定GJA3基因G143R突变是该家系的致病基因突变。
结论 本研究将一中国先天性COPPOCK白内障家系的致病基因定位于13q12.11区域，并发现GJA3基因G143R点突变与此家系共分离。提示我们GJA3基因编码的缝隙连接蛋白对晶体结构的重要性，进一步确认了这个基因在先天性白内障发病机制中的重要作用。GJA3基因G143R突变属于国际首次发现。 |
