| 目的：了解视神经不完全损伤视网膜节细胞、视神经病理学和视功能动态变化，了解视神经不完全损伤诱导视网膜神经节细胞凋亡发生的过程、范围、程为视神经保护研究奠定基础。方法：应用光镜（视网膜视神经HE染色，视神经甲苯胺蓝染色）、电镜和闪光视觉诱发电位(F-VEP)的方法对大鼠视神经不完全损伤后视神经和视网膜进行形态和功能方面的观察。用流式细胞仪法、原位末端标记法、透射电镜法、DNA片段分析法，检测视网膜神经节细胞凋亡的情况。结果：视神经急性损伤F-VEP波形变得低而宽，损伤后1个月波形消失。视神经部分损伤后24-72小时视神经损伤处神经肿胀，出现空泡样变性，间质水肿。7天，髓鞘变性加重，损伤的远近端胶质细胞增生。2周髓鞘崩解产物 大量堆积，。4周神经纤维束结构消失，多数髓鞘、轴突变性、崩解、消失。视神经损伤诱导视网膜神经节细胞（RGCs）严重下降，术后前两周RGCs快速减少，两周时细胞数量几乎减半，两周以后缓慢减少，四周时，丢失50%以上。损伤后可见节细胞线粒体嵴断裂、溶解或消失，粗面内质网、高尔基氏体、核糖体减少，核膜不清。也可见节细胞染色质明显聚集变，伴胞浆萎缩，核膜、胞膜完整。流式细胞仪检测结果可见视神经损伤3天、1周、2周视网膜细胞凋亡率分别为4.17%、15.82%、7.59%。TUNEL染色阳性细胞核呈棕黄色，正常大鼠和视神经损伤后24小时未见TUNEL阳性细胞，损伤后48小时、72小时、1周、2周、4周组TUNEL阳性细胞率依次为1.43%，6.83%，12.47%，4.45%，和1.14%。电镜下同上。DNA片段琼脂糖凝胶电泳，未出现典型的ladder pattern。
结论：大鼠视神经不完全损伤后视功能进行性丧失，符合临床损伤特征；视神经不完全损伤可导致视神经溃变和视网膜神经节细胞进行性死亡，致使视功能严重损害。细胞凋亡是视神经损伤引起RGCs死亡的方式之一。 |
