目的 眼压升高是青光眼的主要危险因素，与小梁网细胞出现早衰密切相关。p38MAPK途径在细胞的氧化应激损伤中发挥重要作用，可能参与了小梁网的激介导的细胞早衰的过程。本研究旨在探索p38MAPK途径上游的MKK6沉默表达对正常人及青光眼小梁网细胞早衰的影响。
方法 构建针对p38MAPK上游激酶MKK6的shRNA干扰载体，并将其转染青光眼小梁网细胞（GTM）和正常小梁网细胞（HTM），形成MKK6负表达的细胞组，以未转染干扰载体的GTM和HTM为对照组，在16h，24h，30h和48h四个时间点分别用SA-β-Gal染色观察各组细胞的衰老情况。
结果 MKK6的shRNA干扰载体，可成功转染青光眼小梁网细胞（GTM）和正常小梁网细胞（HTM）内。RT-PCR的结果显示，GTM细胞的MKK6水平较HTM细胞高30%；MKK6沉默表达后，GTM细胞和HTM细胞的MKK6水平均降低分别为63%和71%。四个实验组的SA-β-Gal染色阳性细胞数均呈现时间依赖的上升趋势。其中GTM组SA-β-Gal染色最为明显，细胞呈衰老形态，细胞皱缩，细胞膜通透性，脆性增加，阳性率最高。而在16h时MKK6沉默的HTM组SA-β-Gal染色阳性率最低。HTM和MKK6沉默的GTM细胞SA-β-Gal染色阳性率介于MKK6沉默的HTM与MKK6表达的GTM之间。
结论 青光眼小梁网细胞出现早衰，MKK6沉默可延迟正常人及青光眼小梁网细胞衰老的发生。