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白藜芦醇诱导人脉络膜恶性黑色素瘤Mum2c凋亡机制的初步研究
作者:李健  文章来源:徐州医学院附属医院  点击数185  更新时间:2012/9/13  文章录入:毛进  责任编辑:毛进
目的 研究白藜芦醇ResveratrolResMum2c增殖凋亡的影响。
方法 CCK-8检测不同浓度(4μg/ml8μg/ml16μg/ml32μg/ml48μg/ml64μg/ml80μg/mlResMum2c增殖的抑制作用。Annexin V-FITC/PI双标流式细胞仪检测不同浓度(16μg/ml32μg/ml404μg/ml48μg/mlRes诱导Mum2c凋亡率的变化JC-1荧光检测不同浓度(32μg/ml40μg/ml48μg/mlRes处理后Mum2c线粒体膜电位变化、酶标法检测caspase-3活性变化、免疫组织化学法检测细胞内Bcl-2表达水平。
结果 Res作用Mum2c后,光镜下可见细胞间隙增大,胞体皱缩、核染色质边集、凝聚;CCK-8检测提示Res具有抑制其增殖的作用32μg/ml40μg/ml48μg/mlRes作用24hMum2c凋亡率分别为7.00±0.98%11.87±0.60%15.39±1.04%,与阴性对照组相比差异具有统计学意义(P <0.05),各组组间相比差异具有统计学意义(P <0.0532 μg/ml40 μg/ml48 μg/mlRes作用24h后,JC-1检测荧光显微镜下观察可见随浓度增加红光片下呈低红染色的细胞比例逐渐增加、高红染色的细胞比例相应减少,各药物浓度组与阴性对照组以及各组组间相比差异具有统计学意义(P <0.05;酶标法检测显示各组caspase-3A值分别为0.246±0.0150.566±0.0270.778±0.018,与阴性对照组(0.151±0.010)相比差异具有统计学意义(P <0.05),各组组间相比差异具有统计学意义(P <0.05);免疫组化法检测显示各组Bcl-2表达阳性的Mum2百分率分别为(49.60±1.51)%、(38.00±1.26)%、(26.67±1.21)%,与阴性对照组(61.33±1.21)%相比差异具有统计学意义P <0.05),各组组间相比差异具有统计学意义(P <0.05
结论 Res具有抑制Mum2c增殖诱导其凋亡的作用,其机制可能与降低线粒体膜电位、激活caspase-3活性、下调Bcl-2表达有关
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