| 目的: 探讨LipofectamineTM2000（LF2000）脂质体介导内皮抑素基因体内转染对CNV模型的抑制效应。方法: 雄性Brown Norway 大鼠60只，激光光凝方式建立CNV模型，随机分为内皮抑素治疗组，空质粒组，对照组，各组20只，以脂质体介导法将重组内皮抑素基因真核表达载体pSecTagA-h内皮抑素和空载质粒pSecTagA分别导入内皮抑素治疗组及空质粒组视网膜下腔，对照组注射生理盐水。采用原位杂交和免疫组化检测眼局部内皮抑素基因组mRNA转录及内皮抑素蛋白表达，ELISA法检测眼及血浆内皮抑素蛋白表达水平；通过脉络膜血管平铺激光共聚焦显微镜、FFA、CD105免疫组化、光镜等指标观察对CNV的抑制效应。结果: 经LF2000脂质体介导内皮抑素基因可有效转染视网膜内、外丛状层，视杆、视椎层，RPE及脉络膜并得到表达。转基因后7及14天测得眼组织匀浆内皮抑素蛋白表达量为506.14±63.41 ng /ml和331.5±42.21 ng/ml，血浆中内皮抑素表达量为25.6±4.65 ng/ml， 15.6±2.19ng/ml，而空质粒组和对照组内皮抑素表达量低于基准值（15.6pg）。内皮抑素治疗组，CNV面积小于空质粒组及对照组（F=285.13 ；P=0.004）；各光凝斑荧光渗漏程度评分结果，内皮抑素与空质粒组及对照组间差别具显著意义（x2= 11.54； P=0.002）；光镜检查，光凝后14天，空质粒组及对照组光凝区脉络膜层增厚，脉络膜毛细血管层内皮细胞大量增殖，光凝斑附近大量 CD105阳性表达细胞；内皮抑素组内皮细胞增生数量明显少于前两组， CD105 的阳性表达量明显降低。结论: 脂质体介导的内皮抑素基因体内转染可以有效抑制CNV的形成 |
