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以羊膜为载体的同种异体角膜缘上皮干细胞膜片移植术后供体细胞的命运变化研究
作者:王君怡  文章来源:武汉大学人民医院  点击数221  更新时间:2012/9/13  文章录入:毛进  责任编辑:毛进

目的 检测以羊膜为载体的同种异体角膜缘上皮干细胞膜片移植术后供体细胞的命运变化情况,为临床治疗提供参考
方法 对碱烧伤角膜缘干细胞缺乏的模型兔进行同种异体角膜缘上皮干细胞膜片移植术。术后7, 30, 60, 90d取角膜,进行冰冻切片,荧光显微镜下观察标记有CM-DiI的供胞的位置和数量PCR检测Y染色体性决定基SRY)表达情况,追踪供细胞的存活情况。通过组织病理学检测、免疫荧光化学等测供体细胞衰老、凋亡及坏死情况
结果 1. 术后供体细胞存活情况:术后7, 30, 60d均可检测到表达红色荧光的供体细胞,SRY基因亦均有表达;术后90d时, 1例移植成功的角膜中仍可检测到供体细胞,PCR亦可检测到SRY基因的表达。2. 术后供体细胞命运变化情况:术后7d内羊膜表面出现大量凋亡、衰老及坏死细胞,以炎细胞为主,仅少量为移植的供体细胞,上皮细胞数量及层数明显增加,大部分区域上皮细胞连接成片;术后30d大部分模型可形成相对完整的角膜上皮,但再生上皮细胞层数减少,变薄,缺乏立方形上皮细胞,同时羊膜下炎细胞浸润,浅基质结构紊乱,大量凋亡、衰老细胞存在于此区;术后60d部分角膜出现再次新生血管化;术后90d时仅1例维持角膜透明,眼表稳定。
结论 以羊膜为载体的同种异体角膜缘上皮干细胞膜片移植可在一定程度上改善碱烧伤眼表微环境,重建眼表功能,但眼表慢性炎症微环境可能是导致供体细胞死亡的重要因素,术前及术后积极抗炎治疗是提高移植成功率的关键。

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