目的 目前普遍认为角膜干细胞存在于角膜缘，但角膜中央区细胞在维持角膜稳态中的作用仍存在争议。本实验观察成年鼠完全去除角膜缘细胞后角膜的变化，探讨角膜中央细胞在维持角膜稳态中的作用。
方法 54只11-26周龄的GFP老鼠随机分为5组：组一：单纯刮除角膜中央上皮；组二：单纯刮除50%角膜缘；组三：刮除角膜中央上皮及50%角膜缘；组四：刮去全部角膜缘；组五：刮除全部角膜上皮。 各组以右眼为实验眼，左眼为对照眼，采用机械性刮除的方法去除中央角膜上皮或角膜缘上皮。术后采用GFP荧光显微镜活体观察角膜上皮细胞的运动、角膜透明性、SR-101血管照影观察新生血管形成等情况。组四在观察50周后双眼行二次手术，左、右眼同时刮除相同范围的角膜中央上皮，术后观察创伤愈合情况。
结果 在单纯刮除角膜中央上皮组（组一）及单纯刮除50%角膜缘组（组二）术后角膜完全恢复正常，没有新生血管形成。在刮除角膜中央上皮及50%角膜缘组及刮除全部角膜上皮组，80%角膜新生血管化，中央区瘢痕形成；刮去全部角膜缘组中85%的角膜术后恢复完全透明，仅15%出现少量新生血管，且仅见于角膜周边，未长入角膜中央，角膜未见瘢痕形成。在观察50周后，对于完全恢复透明GFP鼠，双眼同时进行二次角膜刮除术后，实验眼与对照眼刮除相同范围的角膜上皮，术后发现实验组与对照组角膜愈合的速度相似，达到完全愈合的时间相同。我们采用DAPI染色免疫组化方法证实，角膜缘的上皮细胞被完全刮除。
结论 在一定的环境下，非角膜缘细胞也能够在角膜缘完全缺损的情况下维持角膜上皮的稳态。我们认为可能有两种机制：其一，部分角膜中央细胞具有干细胞的功能；其二，角膜缘的微环境使移行至角膜缘的角膜中央细胞转化为具有干细胞作用的细胞。 |
