目的 观察不同交联程度的牛心包生物补片作为后巩膜加固材料的力学特性及抗钙化、降解情况,进一步探讨后巩膜加固术的作用机制,为临床试验奠定基础。 方法 健康成年纯种新西兰白兔48只,雌雄不拘。体重2.2~2.5kg。随机分为4组,每组12只。A组使用未交联的牛心包生物补片;B 组使用中度交联的牛心包生物补片;C组使用高度交联的牛心包生物补片;D组使用人巩膜组织。手术前常规裂隙灯、间接检眼镜检查,排除有眼部疾患者。同期手术,各组术眼为左眼。后巩膜加固材料为长条形,5×20mm,每眼植入一条。各组分术后2w,4w ,12w ,24w取标本。摘除眼球,洗净血污,切取植片包括其附着的巩膜。分别行HE 染色及免疫组化观察血管化、胶原纤维降解变化情况;原子吸收光度法对牛心包补片进行钙化定量测定。应用BOSE ElectroForce动态力学试验仪对各不同交联度牛心包补片及各实验组巩膜加固区进行生物力学检测。 结果 组织学显示各组植片术后胶原纤维间即有巨噬细胞和淋巴细胞以及浆细胞浸润;组织内部有宿主血浆蛋白的渗入,新生血管开始长入,CD31表达呈阳性。随植入时间的延长,A、D组组织逐渐降解吸收。至24w时已大部被吸收。B、C组胶原纤维结构存在,有部分纤维间隙增加,但纤维排列仍规整,组织无明显降解。至24w时胶原纤维骨架仍完整。A、D组术后4w、12w巩膜加固区的弹性模量和刚度与术后2w相比明显增大,刚度及强度则随着术后时间延长而下降。B、C组术后24w巩膜加固区的弹性模量较其余各时间点减少,术后12w与24w组刚度明显降低,尤其以术后24w组刚度最弱。术后24w B、C组刚度及强度明显高于A、D组。各组植入材料术后均有不同程度的钙含量增加。中度交联的牛心包组织钙含量最高。中、高交联度的牛心包组织,植入术后24w钙含量均较高,二组之间差异没有统计学意义。未交联的牛心包组织与人巩膜组织钙含量在各术后时间点差异没有统计学意义(P值均>0.05)。 结论 交联后的牛心包不仅机械强度大大提高,而且炎性反应轻,耐降解性能好,能在体内长期存留而不被降解吸收。中、高度交联的牛心包均可用于后巩膜加固术,其远期效果优于人体巩膜及未交联的牛心包。 |