目的 研究银杏叶提取物研究银杏叶提取物(EGB)对体外培养缺氧条件下人视网膜色素上皮细胞(RPE)增殖、迁移和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的影响,探讨其作用机制。 方法 对HRPECs 传代培养3~5 代细胞。实验分为:空白对照组:HRPECs;单纯缺氧对照组:CoCl2 (200umol/L)+ HRPECs;药物处理组:EGB+CoCl2(200umol/L)+HRPECs,其中药物处理组又根据 EGB 浓度不同分为 4 组:5、10、50、100 nmol/L,以上各组均处理72 h;观察 EGB作用不同时间对 HRPECs 增殖的影响时,对照组同上,药物处理组分为24、48 、72h,EGB 浓度均为 100 nmol/L。应用Cell Counting Kit-8(CCK-8试剂盒)检测各组OD值,并计算不同浓度、不同时间条件下 EGB 对 HRPECs 增殖的抑制率;应用细胞划痕实验方法检测单纯缺氧对照组:CoCl2 (200umol/L)+ HRPECs;药物处理组:EGB+CoCl2 (200umol/L)+HRPECs条件下 EGB 对 HRPECs 细胞迁移的影响。 结果 CCK-8试剂盒法检测缺氧条件下RPE细胞的增殖抑制率,浓度为100mmol/L的EGB在72h时对缺氧下RPE细胞的增殖抑制率作用最显著,且有统计学意义(P<0.05);随着缺氧时间的延长,RPE细胞的增生能力逐渐增强,在72h时RPE细胞的增生能力最强,并有统计学差异(P<0.05);细胞划痕实验:在EGB在药物作用组时细胞移行和迁移的速度比单纯缺氧对照组时细胞移行迁移速度明显减慢。 结论 EGB对缺氧条件下体外培养人RPE细胞的增殖和迁移具有抑制作用,这种作用具有剂量和时间的依赖性。 |