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大鼠异体角膜缘移植排斥模型中RANTES、MCP-1、Eotaxin基因的表达
作者:王艺蕾 晏…  文章来源:北京大学医学部第一临床医学院眼科 北京市西城区西什库大街8号100034  点击数1686  更新时间:2004/6/16  文章录入:毛进  责任编辑:毛进
目的:建立大鼠角膜缘移植模型,测定模型中趋化因子RANTES、MCP-1、Eotaxin mRNA的表达,从基因水平认识异体角膜缘移植排斥的免疫机制。 方法:(1)48只SD大鼠随机分成三组:异体角膜缘移植组(20只)、自体角膜缘移植组(20只),正常对照组(8只)。板层角膜缘植片分别取自Wistar大鼠任意眼、SD大鼠自体左眼,缝合于SD大鼠右眼植床。依据SD大鼠角膜缘移植术后裂隙灯下眼表评分判断移植排斥的发生。按照异体角膜缘移植排斥组、自体移植组、干细胞缺乏组及正常对照组随机摘取SD大鼠眼球(8只眼/组),应用RNA提取、竞争性RT-PCR、琼脂糖凝胶电泳及凝胶成像分析等方法定量检测各组SD大鼠眼球中趋化因子MCP-1、RANTES、Eotaxin mRNA的表达。统计学方法进行组间两两对比。 结果:(1)SD大鼠异体角膜缘移植排斥主要表现为植片水肿、炎症、新生血管生成等。异体角膜缘移植排斥眼RANTES基因表达明显增加,分别为正常组的7.2倍,自体移植组的4.1倍,角膜缘干细胞缺乏组的3.9倍,组间差异均有统计学意义(P < 0.001);MCP-1基因表达增加,分别为正常眼的4.9倍,自体移植组的2.3倍,干细胞缺乏组的2.9倍,差异有统计学意义(P < 0.01);Eotaxin基因表达与其他各组间的差异无统计学意义(P > 0.05)。对自体角膜缘移植组、角膜缘干细胞缺乏组及正常组中三种趋化因子的基因表达进行组间两两比较,其差异均无统计学意义(P > 0.05)。 结论:RANTES、MCP-1 mRNA在发生异体角膜缘移植排斥的大鼠眼球中特异性升高,提示Th1细胞相关的免疫调控在同种异体角膜缘移植排斥过程中有重要作用。利用分子生物学技术研究趋化因子及其受体的作用将为角膜缘移植排斥机制及防治的探索提供新的靶点。
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