目的  在视网膜干细胞的体外培养过程中，发现一些视网膜干细胞呈悬浮球样生长，一些细胞贴壁生长，这两种视网膜干细胞亚细胞群表现为不同形态，本文将从细胞和分子水平上探讨不同亚细胞群视网膜干细胞的增殖能力和多向分化潜能，为视网膜退行性疾病的干细胞治疗法提供新的思路和实验依据。

方法  1．体外培养视网膜干细胞，经过3-5次传代后分离筛选出悬浮视网膜和贴壁视网膜干细胞，在倒置显微镜下观察并记录两亚群细胞在增殖条件下的生长形态，用生长曲线评估其增殖能力，并用Real-Time
PCR和免疫荧光细胞化学等方法检测视网膜干细胞标记物的表达情况。

2. 血清培养液诱导分化两种干细胞亚群，在倒置显微镜下观察并记录两亚群细胞在分化条件下的生长形态，并通过Real-Time
PCR和免疫荧光细胞化学等方法对视网膜干细胞分化相关的基因和蛋白表达进行分析。

结果  1视网膜干细胞亚群在增殖培养7天后，两种细胞表现为不同的形态，生长曲线显示悬浮细胞具有稍好的增殖能力。Real-Time PCR和免疫荧光细胞化学结果提示：两种视网膜干细胞经多次传代后均表达Nestin，Vimentin和 ki-67 ， 而悬浮细胞表达的Nestin和ki-67比贴壁细胞稍多。

2 在分化培养下，两种视网膜干细胞亚细胞群的形态包括细胞突起的长短及细胞胞体的大小均有差异。Real-Time
PCR和免疫荧光细胞化学显示两种视网膜干细胞亚群都能分化成不同的视网膜视网膜神经元和神经胶质细胞，贴壁细胞更倾向于分化为β3-tubulin，AP2α和map2阳性的视网膜神经元细胞，而悬浮细胞可以较有效地分化成rhodopsin阳性的光感受器细胞。

结论  1悬浮视网膜干细胞与贴壁视网膜干细胞连续传代亦能保持未分化形态，而贴壁视网膜干细胞增殖能力稍弱于悬浮视网膜干细胞。
2视网膜干细胞具有用于治疗视网膜退行性疾病的巨大潜能，实验结果显示贴壁视网膜干细胞可能是潜在视网膜中间神经元或神经节细胞替代疗法的供体细胞，悬浮视网膜干细胞可能较好的成为感光细胞损伤的视网膜疾病治疗的候选细胞。