目的 向RCS大鼠视皮层神经元转染ChR2基因，采用波长为480nm蓝光控制视皮层神经元活动，为基于光基因技术的视皮层视觉假体提供实验和理论依据。
方法 离体培养大鼠视皮层神经元，培养第7天用AAV2-CMV-ChR2-Venous病毒转染神经元，3天后采用全细胞膜片钳记录被转染神经元对480nm蓝光的电生理反应；在体向RCS大鼠视皮层注射该病毒，一月后去除大鼠视皮层部位的颅骨和硬脑膜，用光纤引导480nm蓝光以0.5Hz照射视皮层表面，用插于视皮层内的金属电极记录视皮层对光照的脑电反应，再根据光照刺激周期，对脑电进行叠加平均，获得光照诱发的脑电活动。
结果 转染ChR2基因的培养神经元可对蓝光产生电生理反应，光照时可见细胞存在稳定内向电流（图1）；光照ChR2基因转染的视皮层可诱发视皮层电活动，光照时可见皮层神经元集体放电活动（图2）。
结论 采用基于ChR2的光基因技术可以离体及在体控制视皮层神经元活动，为开发基于光基因技术的视皮层视觉假体建立了实验和理论基础。 |
