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反义寡核苷酸抑制牛视网膜微血管内皮细胞糖化终末产物受体的表达*
作者:夏欣 许迅…  文章来源:上海交通大学附属第一人民医院眼科 200080  点击数1245  更新时间:2004/6/16  文章录入:毛进  责任编辑:毛进
目的 探索糖化终末产物受体(Receptor of Advanced Glycosylation End Products, RAGE)反义寡核苷酸抑制牛视网膜微血管内皮细胞(Bovine Retinal Endothelial Cells, BREC)糖化终末产物受体的表达。 方法 利用选择性培养基获得原代培养牛视网膜微血管内皮细胞,取第二代内皮细胞,观察5’-FAM标记的硫代磷酸修饰型RAGE反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide, ASODN)复合物(RAGE-ASODN),经阳离子脂质体(cationic liposome, CL)介导转染后,在牛视网膜微血管内皮细胞(BREC)中的时相分布。按照所观察的ASODN在细胞内的分布时相,应用逆转录PCR方法,观察了糖化终末产物(Advanced Glycosylation End Products, AGEs)干预12h后,对BREC中RAGE mRNA表达的影响以及ASODN的干预作用。 结果 AGEs上调了BREC中RAGEmRNA的表达(relative IOD=1.337±0.104),与BSA对照组(relative IOD=0.227±0.060)比较有显著差异(P<0.001); 内皮细胞给予ASODN的干预组, RAGEmRNA表达减弱(relative IOD=0.398±0.059),与AGEs干预组比较有统计学意义(P<0.001);而给予正义寡核苷酸(sense oligodeoxynucleotide, SODN)的干预组,RAGEmRNA水平(relative IOD=1.242±0.096)与单纯AGEs组无明显差异(P>0.05)。结论 反义寡核苷酸可以下调内皮细胞由于AGEs诱导的RAGE mRNA水平的变化,提示阻断RAGE的异常表达,对防治糖尿病视网膜病变,将是一个有希望的干预途径。
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