目的 观察表皮生长因子（EGF）对体外不同条件培养下的人Müller细胞系MIO-M1细胞增生移行的影响及其作用机制， MIO-M1细胞是否自身表达和分泌EGF。
方法 对MIO-M1采用BrdU标记法及MTT比色法观察不同浓度的EGF及胎牛血清在正常及缺氧条件下对MIO-M1作用不同时间的影响；应用划痕试验和Transwell定量观察EGF及FBS对MIO-M1细胞移行的影响；通过RT-PCR和ELISA观察MIO-M1细胞EGF的表达和分泌；通过Western试验检测EGF促进MIO-M1细胞增殖迁移是否涉及ERK1/2及Akt信号通路。
结果 培养条件下，EGF及FBS促进MIO-M1细胞增殖的作用具有浓度依赖性，100ng/ml EGF作用最强，增值作用为无EGF作用时的1.6倍，30% FBS增殖作用最明显0.5%FBS、1%FBS无明显增值作用；EGF作用MIO-M1细胞48h时增殖效果最明显，最稳定。10ng/ml EGF对MIO-M1细胞的迁移作用最强，为无EGF作用时的3倍以上，不同浓度EGF在不含FBS与含2% FBS时促进MIO-M1细胞迁移作用趋势一致。在缺氧条件培养下，致MIO-M1细胞半数致死的浓度为600nmol/l COCL2，提前2h加入不同浓度EGF后，10ng/ml EGF对抗缺氧所致MIO-M1细胞的损伤作用最明显。MIO-M1细胞在正常条件下自身不表达和分泌EGF，在缺氧环境（COCL2为700nmol/l)致MIO-M1细胞损伤了70%时自身低分泌7.8pg/mlEGF。EGF通过ERK1/2及Akt信号传导通路促进MIO-M1细胞增殖，10-100ng/ml EGF作用MIO-M1细胞促增殖移行作用信号最明显，且10ng/ml EGF促增殖移行作用信号最强。致细胞半数致死作用MIO-M1细胞后ERK1/2及Akt信号强度减弱，提前2小时加入外源性EGF后通过ERK1/2及Akt信号发挥保护作用。
结论 EGF 对体外不同培养条件下的人MIO-M1细胞具有促增生及迁移的作用；Müller细胞的增生迁移在PVR的发生发展中起重要作用。缺氧条件下，MIO-M1细胞自身可低分泌EGF。EGF主要通过ERK1/2及Akt信号传导通路介导人MIO-M1细胞的增殖移行。加入外源性EGF后通过ERK1/2及Akt信号传导通路发挥保护作用 |
