目的 POAG眼压升高主要是由于小梁网尤其是邻管区细胞外基质的过多沉积，使流出道变窄引起流出阻力增加而导致眼压升高。基质的过多沉积有多种因素参与，本课题就是研究酸性富含半胱氨酸分泌型糖蛋白( secreted protein acidic rich in cysteine,SPARC)对人眼小梁细胞细胞外基质合成的影响。
方法 人眼小梁细胞培养，构建荧光标记的sparc-siRNA并进行细胞转染，分为四组（normal ，siRNA NC， Lipo2000，siRNA1#），real-time PCR、western blot法检测小梁细胞SPARC基因沉默后collagenⅠ、collagenⅢ、纤维连接蛋白（FN） mRNA及蛋白的表达。在众多细胞外基质中，胶原蛋白作为细胞外基质成分对维持小梁网筛网结构，进而维持眼压具有重要作用，体外培养的人眼小梁细胞以Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白含量最多，而纤维连接蛋白（FN）具有稳定和介导细胞粘附的作用，故选择作为研究对象。
结果 人眼小梁细胞SPARC基因经RNA干扰后,其SPARC蛋白表达下降，在转染组Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达升高，而纤维连接蛋白mRNA表达降低，与其余三组有显著性差异（P<0.05）。在蛋白水平的表达，转染组Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达升高，纤维连接蛋白表达降低，与其余三组有显著性差异（P<0.05），与real time-PCR结果相一致。
结论SPARC-siRNA可改变人眼小梁细胞细胞外基质的含量，参与人眼小梁网细胞外基质的代谢，SPARC对人眼小梁细胞细胞外基质的不同成分有不同的调节作用，说明SPARC对小梁细胞细胞外基质的调节作用是多重的，且可能与不同的细胞因子及酶类相联系，在此过程是由什么因素介导的还有待于进一步研究。 |
