目的 观察FK506对常规及高糖培养条件下的人视网膜Müller细胞系的增殖状态、凋亡的影响。
方法 （1）采用细胞爬片免疫组织化学鉴定大鼠视网膜müller细胞系。（2）应用100 PMFK506对常规培养及高糖培养条件下的大鼠视网膜Müller细胞进行干预。流式细胞仪AnnexinV-FITC PI双标染色检测视网膜Müller细胞系凋亡比例；ELISA检测其对视网膜Müller细胞VEGF表达的影响；免疫组化检测其对视网膜Müller细胞P53表达的影响。
结果 （1）药物干预后48小时后流式细胞仪测定视网膜Müller细胞凋亡。空白对照组凋亡比例：（17.967±1.222）%；FK506组凋亡比例: （18.600±1.3）%; 高糖组凋亡比例：（45.767±3.301）%；高糖+FK506组：（32.867±1.815）%。FK506组与正常组比较：无统计学差异(p=0.994)；高糖组与正常组比较：有统计学差异(p=0.004)；高糖组与高糖+FK506组比较:无有统计学差异(P=0.102)。（2）ELISA结果：FK506对正常细胞的VEGF的表达浓度无明显影响；在高糖组，FK506较对照组的视网膜Müller细胞的VEGF的表达浓度低，但其组间无统计学差异（F值：1.08 ；p=0.4244）；考虑可能样本量较小，影响比较结果。(3) 免疫组化结果：高糖组P53的表达明显上调，FK506可下调高糖组的P53的表达。阴性对照组与FK506组见比较，无统计学差异 (F=1.187867，P=0.34)；高糖组与阴性对照组比较：有统计学差异（F=16.53，P<0.05）；高糖组与高糖加药组比较，有统计学差异 (F= 18.34，P=0.01)。
结论 FK506可抑制高糖（含25mmol/L葡萄糖）培养条件下的大鼠视网膜Müller细胞的增殖，减少凋亡的发生，但对常规培养的细胞凋亡则无影响。FK506对正常细胞的VEGF的表达浓度无明显影响；但在高糖组，FK506较对照组的视网膜Müller细胞的VEGF的表达浓度低，但无统计学差异（P>0.05。高糖组P53的表达明显上调，FK506可下调高糖组的P53的表达。上述结果提示FK506可能有抑制新生血管发生的作用，成为增殖性糖尿病视网膜病变的有效药物。 |
