打印本文 打印本文 关闭窗口 关闭窗口
调控bfgf基因转染的成肌细胞治疗鼠眼外肌损伤的研究
作者:张立贵  文章来源:滨州市沪滨眼科医院  点击数242  更新时间:2012/9/13  文章录入:毛进  责任编辑:毛进
目的 探讨将调控bfgf基因转染的成肌细胞移植到损伤后的鼠眼外肌组织中,四环素调控目的基因表达损伤肌肉的修复情况。
方法 1通过夹持法损伤鼠眼外肌。2转染了pcDNA4/TO/myc-HisTMA-bFGF的成肌细胞注入试验组受损的鼠眼外肌中,并根据术后不同时段给或不给四环素分亚组,同时设对照,未损伤者为正常组。3胶体金标记法检测注入的成肌细胞在肌肉中的成活情况。4移植细胞肌肉的修复情况。5采用ABC-ELISA法检测目的基因bfgf在受损鼠眼外肌中的表达分泌情况。6采用Bradford比色法测定MyoDJNK1p38的蛋白含量,探索移植细胞在组织中的生长,迁徙和分化情况。
结果 病理证实成功建立了鼠眼外肌损伤动物模型,光镜和电镜下,胶体金标记的成肌细胞移植到鼠眼外肌后,与宿主眼肌生长为一体;不同时象点1w2w3w4w给四环素的试验组1与对照组1比较,1w时试验组1肌组织的损伤炎症反应明显比对照组1轻,2w时可见大量的成肌细胞出现,3w时产生大量的肌纤维,4w时肌增生良好,瘢痕不明显;对照组11w时炎症反应明显,2w时出现大量的成纤维细胞,3w时产生大量的胶原纤维,4w时损伤部分基本被瘢痕组织代替。试验组给四环素3dbfgf的含量明显高于不给药组,2w时达高峰,持续4w之久,半途停药后则迅速降低,半途给药后又迅速增高,更高于相应时段的对照组(P<0.01),正常组、对照组和试验组bfgf含量在相应时象点依次增加。MyoDp38蛋白含量的变化和bfgf蛋白含量的变化成正相关性。JNK1蛋白的含量表现比较特殊,试验组和对照组的含量皆明显高于正常组P<0.01),但对照组的含量最高,与试验组bfgf基因高表达相应时象点比较有显著性差异(P<0.01),即试验组bfgf基因高表达时JNK1蛋白的含量反而降低
结论 1转染了pcDNA4/TO/myc-HisTMA-bFGF的成肌细胞注入受损的鼠眼外肌中能够成活,增值和分化。(2)四环素可以比较灵敏的调节bfgf基因在活体的表达,分泌bfgf蛋白,有效地修复眼外肌的损伤。(3)在移植成肌细胞bfgf基因表达产生的bfgf主导的肌损伤修复过程中,MyoD的表达是增强的,同时可能与MAPK家族 p38表达增加,JNKI表达降低有关。
打印本文 打印本文 关闭窗口 关闭窗口