目的 总结2001年以来国家“十五”863项目和“十一五”863重大项目“基于胚胎角膜组织库的工程角膜开发与应用（2006AA02A132）” 和“新型壳聚糖组织器官修复材料的研究（2007AA901603）”的研究工作，初步研制出组织工程人工角膜内皮作为临床角膜移植的角膜内皮替代物，探讨角膜内皮盲患者及白内障患者手术所致角膜内皮盲患者复明的新途径。
方法 1、人角膜内皮细胞的克隆化及正常二倍体细胞单克隆的筛选研究。2、通过培养和接种条件研究，获得正常二倍体且形态结构与功能正常的人角膜内皮种子细胞。3、羊膜载体支架的制备与修饰研究。4、开展修饰羊膜载体支架与人角膜内皮种子细胞的生物相容性研究。5、研究新型壳聚糖角膜内皮细胞载体膜片的性能和修饰，筛选具有透明、通透性、生物相容性、细胞贴附性和可吸收性均佳的载体膜片。6、功能性组织工程人角膜内皮的重建研究。7、组织工程人角膜内皮的动物移植实验研究。
结果 首次建立了未经任何癌基因转染的无致瘤性人角膜内皮细胞系，所生产的人工角膜内皮目前已使新西兰兔角膜持续维持透明343天，家猫角膜持续维持透明162天，猕猴角膜持续维持透明71天；相关技术和研究成果获国际专利1项，发表学术论文9篇。本课题所取得的研究成果在北京顺利通过了教育部组织的科技成果鉴定，荣获“国际首创，达到了国际领先水平”的鉴定结论。
结论 1.建立了非转染、无致瘤性的人角膜内皮细胞系，首次解决了组织工程人角膜内皮规模化生产缺乏足量种子细胞的难题。2.建立了羊膜倒置消化和包被修饰技术。3.在国际上建立了组织工程人角膜内皮生产技术工艺。4.所生产的组织工程人角膜内皮首次可使兔、猫、猴三种动物的角膜长期持续维持透明，解决了组织工程人角膜内皮无法使角膜长期维持透明的难题。5.组织工程人角膜内皮有望用于角膜内皮盲的临床治疗。
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