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高氧诱导小鼠视网膜新生血管过程中不同细胞因子mRNA表达水平的检测
作者:许玲俐  文章来源:浙江大学医学院附属第二医院  点击数283  更新时间:2012/9/13  文章录入:毛进  责任编辑:毛进

目的 研究高氧诱导小鼠视网膜新生血管发生过程中血管内皮生长因子(VEGF),成纤维细胞生长因子(bFGF),内皮抑素(ET)和乙酰肝素酶(HPA)在视网膜中的表达。 
方法 实验组将21只新生7天幼鼠放于体积分数约75%的高氧环境中饲养5天,再置于正常环境中饲养。另外21只新生幼鼠在正常环境中饲养作为正常对照组。分别在小鼠出生后第121725天通过高分子量荧光素血管造影观察视网膜血管形态变化。并取小鼠视网膜,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测不同时间点视网膜组织中VEGFbFGFETHPA mRNA水平的变化,比较高氧组与对照组的差异。
结果 高氧组小鼠在生后12天时主要表现为后级部大片无灌注区,视网膜血管管径变细,分支减少,仅在周边部网膜形成少量血管网,正常对照组血管分布均匀,走形正常;而在生后17天时,高氧组小鼠血管走形迂曲紊乱,可见大量新生血管存在,对照组血管则均匀分布于整个视网膜;生后25天时高氧组血管分布较前均匀,但仍存在一定量的新生血管。另外生后3个不同时间点高氧组VEGFbFGFHPA mRNA表达水平逐渐增高,与对照组比较差异有统计学意义(F=113.608, P=0.000,F=59.235,P=0.000,F=188.493,P=0.000)。而ETmRNA表达水平逐渐降低,与对照组比较差异有统计学意义(F= 32.365,P=0.000)。
结论 应用75%浓度的高氧可成功诱导小鼠视网膜新生血管形成,在新生血管形成过程中VEGFbFGFHPA作为进视网膜新生血管生长的重要因子,其mRNA表达水平升高;而ET作为抑制视网膜新生血管生长的细胞因子,其mRNA表达水平降低。

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