目的:建立一种能够及时预测术后眼增殖性病变复发风险高低的细胞活力测定技术,从细胞分子水平为术后同步防治和降低术后眼增殖性病变的复发率,提高手术疗效提供一种全新的预测系统。方法:取自2004年1月至4月源自北京同仁眼科中心各种玻璃体切割标本共计115例,男性60例,女性55例。平均年龄46.12±8.38。其中,糖尿病性视网膜病变(BDR和PDR)标本48例,各型视网膜脱离(RD)标本42例,黄斑前膜和裂孔标本3例, 玻璃体机化标本5例,玻璃体出血标本13例,视网膜血管炎标本1例,BRVO标本2例, Eales病标本1例。取材和细胞培养均为随机双盲法设计,术后3小时内完成细胞接种培养。按胡氏改良法操作:标本离心,1500rpm, 5’; 取沉淀用荧光素标记,100u/ml透明质酸酶联合1000u/ml I型胶原酶消化10’;D-Hanks液和F12培养液洗涤两次,30%FBS的F12培养液混悬接种,85%相对湿度下倒置培养,待膜块贴壁后翻瓶培养,72小时后观察组织块边缘细胞爬行生长和增殖情况。结果 (1). 115例玻切标本中,有46例出现细胞爬行和增殖(40%)。其中,DR组为18例(39.15%),RD组为17例(36.95%);玻璃体出血病变组为5例(10.88%); 其他病变组合计为6例(13.04%)。(2). 8例IV期BDR中,1例出现细胞生长(12.50%);14例V期BDR中,6例出现细胞生长(42.85%);10例V期PDR中,4例出现细胞生长(40%);4例VI期BDR中,2例出现细胞生长(50%);12例VI期PDR中,5例出现细胞生长(41.67%)。30例孔源性RD组中,13例出现细胞生长(43.33%); 3例渗出性RD中,1例出现细胞生长(33.33%);9例RD术后复脱标本中,3例出现细胞生长(33.33%)。结论: 细胞生长能力直接反映眼内组织增殖状态,本研究发现RD和DR等玻切膜组织细胞增殖率接近临床报道的术后增殖性病变复发率,提示该技术广阔的应用前景,通过后期深入研究将能解决以往玻切术后难以知晓增殖病变是否复发以及如何防治的难题。 |