目的 研究26例散发性Leber先天性黑矇患者的视网膜色素上皮(RPE65)基因的遗传学特点;筛选可能的致病基因突变位点或单核苷酸多态性(SNP)位点。
方法 EDTA抗凝的采血管采集Leber先天性黑矇患者静脉血3~5 ml，并提取基因组DNA。应用聚合酶链反应(PCR)扩增RPE65基因的所有外显子及外显子-内含子连接处,测序确定致病的基因突变。如测序结果有突变,对该突变单核苷酸多态性研究(www.ncbi.nlm.nih.gov/snp),以排除该突变为已知的正常多态位点。
结果 对26例患者行RPE65基因14个外显子检测,共发现了3处SNP位点：12例患者在RPE65基因第10外显子出现了SNP的改变;2例患者在RPE65基因第11外显子发生了SNP的改变;12例患者在RPE65基因第12内含子发生了SNP的改变。
结论 本组26例散发性Leber先天性黑矇患者的临床表型可能与RPE65基因突变无关。但在26例患者中有近50%的患者在相同位点出现了单个的碱基改变，即SNP。尤其是位于RPE65基因编码区—第10、11外显子区域的SNP，这对于今后Leber先天性黑矇患者RPE65基因进行快速规模化筛查具有一定的意义。 |
