目的 糖尿病视网膜病变（DR）中糖基化终产物（AGE）通过细胞内过氧化物和炎性因子的产生，导致视网膜微血管内皮细胞（RMEC）凋亡，视功能破坏。本文观察藏红花素对在AGE作用下RMEC活性、凋亡比例、活性氧簇（ROS）产物、细胞内和上清中肿瘤坏死因子（TNF）-α含量的干预，探讨藏红花素对AGE引起RMEC凋亡的保护机制。
方法 采用免疫磁珠法分离培养RMEC，10μmol/L、50μmol/L和100μmol/L藏红花素培养液作用RMEC，观察4 d内细胞增生变化并记录生长曲线。不同浓度藏红花素溶液作用AGE处理的RMEC 12 h，台盼蓝染色计数活细胞率，流式细胞术检测凋亡比例，荧光光度计测定细胞内ROS含量，采用蛋白电泳和ELISA测定RMEC中和上清中TNF-α含量。
结果 RMEC在10μmol/L和50μmol/L藏红花素的培养液中可以继续增生，3d、4d，100μmol/L藏红花素细胞增生可能受到抑制。与对照组相比，100mg/L AGE处理12h和24h后RMEC活细胞比例明显下降(P<0.01)。10、50和100 μmol/L藏红花素可不同程度保护AGE处理后RMEC活细胞比例(P<0.01)。与对照组（0.06%±0.03%）相比，100mg/L AGE处理12h后凋亡细胞比例（23.72%±4.57%）明显升高（P＜0.01），10、50和100 μmol/L藏红花素处理12h后凋亡细胞比例下降，分别为8.70%±1.54%、4.39%±0.47%和3.54%±1.79%。AGE处理12h后RMEC内ROS水平明显升高（P＜0.01），10、50和100 μmol/L藏红花素可不同程度抑制AGE处理后RMEC内ROS水平（P＜0.01）。AGE处理后RMEC内和上清液中TNF-α水平明显升高（P＜0.01），10、50和100 μmol/L藏红花素可明显抑制AGE处理后RMEC内和上清液中TNF-α水平（P＜0.01）。
结论 藏红花素可能通过抑制AGE诱导RMEC中ROS产生并减少TNF-α合成途径，防止细胞凋亡。 |
