目的 观察糖尿病(DM)大鼠经尾静脉或玻璃体腔注射人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)后对糖尿病视网膜病变(DR)的治疗作用。 方法 尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)诱导SD大鼠DR模型。将40只大鼠随机分为DR组(B组)、尾静脉注射1*10^6~7 hUCMSCs 组0.5ml(C组)、尾静脉注射安慰剂组0.5ml(D组)、玻璃体腔注射1*10^6~7 hUCMSCs 组2µl(E组)、玻璃体腔注射安慰剂组2µl(F组)。正常对照组(A组,8只)和B组无处理。每2-4w监测血糖。采用闪光视网膜电图(F-ERG)评估视网膜功能,免疫组织化学法观察视网膜脑源性神经营养因子(BDNF)阳性染色的情况,实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测视网膜BDNF mRNA的表达。采用单因素方差分析和LSD-t检验进行统计学分析。 结果 DM大鼠血糖较高,C组血糖水平随时间逐渐降低,2w-4w间血糖降低较快(P=0.012),在各时间点与其余组之间差异显著(P<0.01)。各组F-ERG暗适应a、b波峰潜时、暗适应b波振幅及振荡电位(OPs)总振幅比较,差异均有统计学意义(P<0.05);各组暗适应a波振幅比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。免疫组化切片显示,A组BDNF表达呈阳性,主要位于视网膜神经节细胞层;B、D、F组BDNF各层表达量明显减少;C、E组BDNF表达增多,E组更为明显。RT-PCR检测结果显示:4w、6w、8w 时5个DR组间视网膜BDNF mRNA相对表达量具有显著差异(P=0.000),C、E组表达量逐渐增加,B、D、F组表达量逐渐减少,二者具有显著差异(P<0.01)。8w时E组表达量明显高于C组(P=0.009)。 结论 尾静脉注射hUCMSCs能够显著降低血糖水平;尾静脉或玻璃体腔注射hUCMSCs均可改善DR视网膜功能,增加BDNF的表达,其中玻璃体腔注射效果更佳。 |