目的 探究SIRT1活性介导线粒体生物合成参与RGC-5线粒体凋亡的具体机制。
方法 建立体外培养的RGC-5细胞血清剥夺模型，Hoechst33258染色检测1-72小时细胞凋亡比率，并收获细胞进行蛋白质印迹检测SIRT1以及下游调节蛋白PGC-1α的时空表达。凋亡模型中血清剥夺12和24小时RGC- 5细胞分别受到白黎芦醇（SIRT1的激动剂）与尼克酰胺（SIRT1的拮抗剂）作用，检测细胞凋亡比率以及胞浆Caspase-3的表达和线粒体细胞色素c的释放水平。
结果 血清剥夺诱导的RGC-5细胞凋亡模型成功建立，SIRT1蛋白表达水平随时间延长呈持续增加趋势，线粒体凋亡蛋白Caspase-3和细胞色素C释放增加。白黎芦醇可上调SIRT1的表达,并减少RGC-5细胞凋亡比率，降低Caspase-3和细胞色素C的释放，而尼克酰胺通过抑制SIRT1的表达活性发挥促凋亡作用。
结论 在血清剥夺氧化应激模型中，线粒体功能障碍是参与RGC- 5细胞凋亡的主要途径。通过调节SIRT1表达水平参与RGC-5的线粒体生物合成，是保护RGC-5细胞免于凋亡的重要机制之一。本课题受国家自然科学基金（81170849）；广东省自然科学基金（S2011020002401）;眼科学国家重点实验室专项经费资助（2011C02）资助。