目的 观察PDGF-BB/PDGFR-β、Angiopoietin-1/Tie-2信号系统在氧诱导视网膜病变(oxygen induced retinopathy, O IR)小鼠视网膜新生血管形成中的表达。 方法 将出生后第7 天( P7) 的C57BL/6J 乳鼠与母鼠一起放入含氧量75%的空气内5天,在第12天(P12),将其放回室内正常空气中饲养。在不同时间点(P7、P8、P10、P12、P12.5、P13、P14、P15、P17、P19和P21),提取66只正常小鼠和66只OIR小鼠视网膜的RNA,应用Real-time PCR检测不同时间点视网膜中VEGF、PDGF-BB、PDGFR-β、Angiopoietin-1、Tie-2 的mRNA表达水平。对3只P17 OIR和3只P17正常小鼠进行冰冻切片,应用免疫荧光染色技术观察PDGF-BB、PDGFR-β、Angiopoietin-1、Tie-2蛋白在小鼠视网膜的表达。应用ΔΔCT法对real-time PCR的mRNA结果进行分析。 结果 与正常对照组相比,OIR组小鼠视网膜VEGF、PDGF-BB 的mRNA在P12.5、P17出现双峰值; PDGFR-β、Angiopoietin-1、Tie-2的mRNA也P19达到峰值,差异有统计学意义。免疫荧光显示PDGF-BB、 PDGFR-β在富含视网膜新生血管的神经节细胞层和外丛状层有表达;Angiopoietin-1在视网膜神经节细胞层、内丛状层、内核层和外丛状层有表达;Tie-2在视网膜神经节细胞层、内丛状层和外丛状层有表达。 结论 PDGF-BB/PDGFR-β信号系统参与小鼠视网膜新生血管形成,Angiopoietin-1/Tie-2信号系统在小鼠视网膜新生血管成熟中起到重要作用。 |