目的 在胚胎表皮外胚层中特异性敲除smad4能够导致胚胎小鼠眼前节发育异常，表型类似于人类的Peters异常和Axenfeld-Rieger 综合征。本研究利用smad4条件敲除的小鼠，对导致这一现象的具体分子机制进行进一步研究和深入探讨。
方法 利用lecre-flox 系统在胚胎小鼠表皮外胚层中将Smad4 特异敲除，基因型为Lecre smad4fl/fl为实验组，smad4fl/fl为对照组。利用HE染色观察实验组与对照组眼前节组织形态变化；利用免疫组化，免疫荧光方法检测E钙粘连蛋白在晶状体上皮细胞，角膜及结膜表达差异；BrdU检测上皮细胞，角、结膜细胞增殖情况。
结果 Smad4 条件敲除小鼠的晶状体从表皮外胚层脱离受阻，形成了一明显的“晶状体茎”，晶状体上皮与角膜内皮粘连；角膜基质层明显增厚；下方视网膜有明显褶皱。实验组小鼠的晶状体上皮细胞增殖明显低于对照组，且实验组角膜上皮细胞，睑结膜，球结膜细胞增殖均低于对照组；此外，实验组角膜上皮，眼睑上皮细胞E钙粘连蛋白表达与对照组相比减弱。
结论 结果提示smad4的正常表达对于晶状体泡的分离，角膜的分化以及整个眼的发育都有重要作用。这种作用可能是通过对E钙粘连蛋白表达以及细胞增殖的调节实现的。 |
