目的 检测高糖对人视网膜血管内皮细胞(human retinal capillary endothelial cells, HRCECs)凋亡及胰岛素样生长因子1及其受体(insulin-like growth factor-1/receptor-1R, IGF-1/IGF-1R)表达的影响。
方法 1、将HRCECs分为二组：a.正常对照组：DMEM培养基（25mmol/L葡萄糖）；b.高糖组：条件培养基（90mmol/L葡萄糖）。两组细胞分别培养2h, 6h, 12h, 18h, 24h, 48h，荧光定量PCR检测IGF-1/IGF-1R mRNA表达水平，确认最佳培养时间。2、根据不同葡萄糖浓度(25, 30, 40, 60, 90, 130mmol/L)将HRCECs分为六组，荧光定量PCR检测IGF-1/IGF-1R mRNA表达水平，确认最佳培养浓度。3、将HRCECs分为三组：a.正常对照组： DMEM培养基（25mmol/L葡萄糖）；b.高糖组：条件培养基（90mmol/L葡萄糖）；c.甘露醇组：条件培养基（65mmol/L甘露醇+25mmol/L葡萄糖）。三组细胞分别培养12h, 24h, 48h, 72h, 4d, 5d, 6d，流式细胞仪检测HRCECs凋亡率。
结果 1、IGF-1 mRNA表达水平在高糖24h组最低，IGF-1R mRNA表达水平在高糖18h组和24h组明显升高，与正常组及高糖2h组相比差异有统计学意义(P<0.05)。2、不同糖浓度组IGF-1/IGF-1R mRNA表达结果显示，与25mmol/L组相比，90mmol/L组IGF-1 mRNA表达水平最低(P<0.05)，90mmol/L组和130mmol/L组IGF-1R mRNA表达水平明显升高(P<0.05)。3、HRCECs凋亡率结果示，正常对照组无HRCECs凋亡，甘露醇组在培养72h后出现HRCECs凋亡但凋亡率小。高糖组在培养48h后开始出现HRCECs凋亡，凋亡率随时间延长而逐渐增大。与同时间点甘露醇组相比，高糖组HRCECs凋亡率明显增大且差异有统计学意义(p<0.05)。
结论 高糖可诱导HRCECs凋亡，同时伴有IGF-1 mRNA水平下降及IGF-1R mRNA水平升高，可能与早期糖尿病性视网膜病变发病机制有关。