目的 本实验观察低密度脂蛋白(n-LDL)及氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对体外培养的人视网膜色素上皮细胞MMPs/TIMPs表达的影响。 方法 分别使用LDL和 OX-LDL 对RPE细胞进行培养24小时,采用MTS观察细胞的增殖,采用TUNEL及流式细胞观察细胞的凋亡。运用Real-time PCR 及ELISA方法检测LDL和 OX-LDL 对RPE细胞进行培养24小时后,金属基质蛋白酶(MMP-2)及金属基质蛋白酶抑制剂(TIMP-3)的表达。 结果 与SFM相比,用10LDL10mg/L LDL对RPE细胞有轻度促增殖作用,OX-LDL 处理24h后引起细胞活力下降,与SFM 和10mg/L LDL 相比,10mg/L OX-LDL 处理 24 h 后能诱导RPE细胞凋亡率增加2-3倍 (P < 0.05)。 与SFM 对照组相比,10mg/L LDL组的凋亡率无明显统计学差异细胞凋亡率增加(P<0.05)。 MMP-2 及 TIMP-3 基础分泌量为6. 455 ± 0.85 ng/mL及 267.25 ± 41.12 pg/mL。 10,50,100 mg/L LDL 及 10 mg/L OX -LDL 处理后,MMP-2 蛋白表达量降低,而10及 50 mg/L OX-LDL处理后,TIMP-3 蛋白表达量增加。LDL和 OX-LDL处理RPE细胞后,MMP/TIMP率失调。 结论 OX-LDL可改变RPE细胞的活力和形态。 LDL和 OX-LDL处理RPE细胞后,MMP/TIMP率失调。本研究为AMD的发病机制提供了又一新的思路,为将来AMD的防治提供科学依据,具有一定的理论意义和现实价值。 |