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小鼠慢性高眼压模型和视网膜缺血再灌注模型中视网膜神经节细胞的变化
作者:杜磊  文章来源:武汉大学人民医院  点击数251  更新时间:2012/9/13  文章录入:毛进  责任编辑:毛进
目的 在小鼠慢性高眼压模型和视网膜缺血再灌注模型中观察视网膜神经节细胞的变化
方法 16Thy1-CFP小鼠和25Thy1-CFP分别入选慢性高眼压和视网膜缺血再灌注损伤组。慢性高眼压模型通过激光光凝巩膜缘在4周时间内造成小鼠慢性持续性的高眼压状态。在视网膜缺血再灌注损伤模型中于损伤后的13天、1周、2周、4周时间点分别处死5只小鼠。在慢性高眼压和视网膜缺血再灌注损伤两个实验组处死动物取出眼球后制作通过视网膜铺片计数CFP+ 细胞数和Brn-3b免疫荧光染色的方法对视网膜神经节细胞计数。此外,两个实验组动物的视神经制成冰冻切片,荧光显微镜观察损伤前后视神经荧光强度的变化。通过光镜观察慢性高眼压损伤后和视网膜缺血再灌注损伤后视网膜各层细胞的病理学改变。
结果慢性高眼压损伤组,4周后 RGCs细胞数量和视神经荧光强度均较对照眼明显下降(RGCs 细胞数量减少24.4%±6.4% ,视神经荧光强度降低 25.3±5.2%)。在视网膜缺血再灌注损伤后的13天、1周、2周、4周时,RGCs数量百分比分别减少到45.4%±7.4%39.3%±9.1%36.2%±7.4%24.9%±6.7%21.8%±8.4%。(均数±标准差)。Brn-3b免疫荧光染色计数RGCs的结果和CFP+ 细胞计数的结果类似。
讨论 本研究在慢性高眼压损伤模型和视网膜缺血再灌注损伤模型中观察了视网膜神经节细胞的数量和图像学变化,这为研究神经变性疾病中视网膜神经节细胞的变化提供了一条途径。
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