目的 创新性地采用荧光法观察核黄素在巩膜组织中的饱和时间及渗透特性，以探索和建立巩膜紫外线A-核黄素交联疗法核黄素给药的合理方案。
方法 选取新西兰白兔12只，处死后对颞上方赤道部巩膜组织随机采取以下处理：①检测同浓度核黄素不同给药时间段的巩膜荧光特征：分别对巩膜滴加0.1%核黄素溶液0（空白对照）、1、2、4、5、6、8、10、15、20、25、30分钟，之后取巩膜组织。②检测同浓度核黄素不同给药时间+相同紫外线交联量时的巩膜荧光特征：对巩膜滴加0.1%核黄素溶液5分钟和30分钟后都用紫外光（370nm，3mw/cm2，照射距离1cm，照射时间30分钟）照射。③检测相同核黄素浓度和给药时间+不同紫外线交联量时的巩膜荧光特征：对巩膜滴加0.1%核黄素溶液30分钟后用紫外光（同上）分别照射10、20、30分钟。此后将各巩膜组织立即制成冰冻切片，用激光扫描荧光显微镜观察比较不同巩膜切片的荧光特征并照相。
结果 未应用核黄素的空白组织几乎未见荧光，用核黄素浸润后，短时内荧光变化较为明显，巩膜切片的绿色荧光随作用时间延长而逐渐增强，20-30分钟后荧光达到较强水平且分布比较均匀。预先用核黄素溶液浸润30分钟后再行紫外光照射30分钟的巩膜组织，与浸润时间缩短及照射时间不足的切片相比，其荧光分布更为均匀，纤维组织增粗且结构相对致密。
结论 0.1%的核黄素溶液滴加浸润巩膜组织30分钟可基本达饱和状态，此时再行紫外光照射30分钟可取得较好的交联效果。用荧光法观察核黄素在巩膜组织中的渗透及饱和特性，是一种较为直观、可行的新方法。 |
