目的 探讨降低内源性微小RNA-320c (miR-320c)水平是否影响人视网膜血管内皮细胞(human retinal capillary endothelial cells,HRCECs)凋亡及胰岛素样生长因子1及其受体(insulin-like growth factor-1/receptor-1R,IGF-1/IGF-1R)表达。
方法 将HRCECs分为四组：a.高糖组；b.空转组（等量lipo2000）;c.阴性对照组（等量lipo2000+miR-320c抑制剂阴性对照组）;d.miR-320c抑制剂组（等量lipo2000+miR-320c抑制剂组）（降低内源性miR-320c水平）。在2ml转染体系，通过转染5ul脂质体lipo2000，以100nmol/L miR-320c抑制剂或miR-320c抑制剂阴性对照物转入HRCECs，6h后更换高糖培养基（含90mmol/L葡萄糖）后继续培养。培养24h后荧光定量PCR检测IGF-1/IGF-1R mRNA表达水平，培养4d, 5d, 6d后采用流式细胞仪检测HRCECs凋亡率。
结果 与高糖组、阴性对照组及空转组相比，miR-320c抑制剂组IGF-1 mRNA表达水平明显升高，差异有统计学意义(P<0.05)，IGF-1R mRNA表达水平降低但差异无统计学意义(P>0.05)，miR-320c抑制剂组HRCECs凋亡率明显降低，差异有统计学意义(p<0.05)。
结论 抑制miR-320c表达可升高IGF-1 mRNA表达水平，减少HRCECs凋亡，可能为早期糖尿病性视网膜病变的治疗提供一种新思路。 |
