目的 探讨蛋白酶激活受体2（PAR-2）对低氧诱导视网膜神经节细胞凋亡的影响。
方法 我们采用视网膜神经节细胞株RGC-5细胞作为研究对象，建立低氧损伤模型（5%O2）。实验分为常氧组、低氧组、低氧+ PAR-2激动剂组（SLIGRL）、低氧+ PAR-2抑制剂组（ENMD-1068）。采用免疫荧光细胞化学、real-time PCR及western blotting等方法明确PAR-2在损伤条件下RGC-5细胞中的表达及定位；采用CCK-8检测细胞的存活，Hochest33342观察细胞凋亡的形态，Annexin-FITC/PI法检测RGC-5细胞的凋亡率，western blotting检测各组凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax 及Caspase-3的表达水平。
结果 在离体培养的RGC-5细胞中，予以低氧处理3h、6h、12h、24h、48h，PAR-2表达在RGC-5细胞膜上并在低氧损伤情况下表达逐渐上调，24h达高峰，48h后降至正常水平；与低氧组比较，低氧+PAR-2激动剂组可使细胞的凋亡率、Bax 蛋白及Caspase-3表达降低，而使Bcl-2 蛋白的表达增加；PAR-2 减少细胞凋亡的效应可被PAR-2抑制剂ENMD-1068部分阻断。
结论 PAR-2活化后可通过增加Bcl-2/Bax的比值、降低Caspase-3的表达来减少低氧诱导的视网膜神经节细胞的凋亡，保护细胞存活，从而发挥神经保护作用。 |
