目的 角膜基质细胞在正常条件下处于静息状态，但在角膜损伤后，组织分泌的TGFβ可诱导其向角膜肌成纤维细胞转化，合成、分泌并沉积细胞外基质成分，造成角膜Haze甚至角膜瘢痕形成。本研究拟探讨TGFβ诱导的角膜肌成纤维细胞分化及其表观遗传修饰机制。
方法 采用原代培养的人角膜成纤维细胞和HTK细胞系，用TGFβ、组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDAC抑制剂，如曲古霉素A、丁酸钠等）、NOX抑制剂DPI、抗氧化剂NAC分组进行处理，收集培养上清和细胞样品，行定量PCR、ELISA、western blot、免疫细胞化学分析，并对细胞内活性氧（ROS）、H2O2、谷胱甘肽水平，以及细胞总抗氧化能力进行测定。
结果 TGFβ诱导了角膜成纤维细胞向肌成纤维细胞表型的分化，主要表现为形态学改变、细胞质内骨架蛋白的重排和细胞外基质成分合成的增加，同时，角膜成纤维细胞内ROS、H2O2水平明显上调，细胞内谷胱甘肽水平和细胞的总抗氧化能力显著下降。HDAC抑制剂明显抑制了TGFβ诱导的角膜肌成纤维细胞的分化，伴随着组蛋白乙酰化状态的改变，同时提高了细胞的谷胱甘肽水平和总抗氧化能力，同时降低了细胞内ROS和H2O2水平，NOX抑制剂和抗氧化剂NAC也起到类似作用。此外，HDAC抑制剂可促进NRF2转录因子向细胞核的转运和累积，同时上调NRF2下游基因（如catalase、SOD2，NQO1等）的表达。
结论 TGF-β可诱导角膜成纤维细胞分化为肌成纤维细胞，此分化过程与组蛋白（去）乙酰化修饰和NRF2转录因子的调控有关。
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