目的 比较组织对位缝合与错位缝合状态下兔角膜板层伤口愈合以及几种瘢痕相关因子的表达

方法和材料 采用2.5kg左右的雄性新西兰白兔50只,40只为手术组,10只为空白对照组.麻醉后,随机选一只眼在角膜的瞳孔两侧各做一个“工”字型切口,深度为1/2CT,横向跨度3mm,纵向长度6mm,并沿纵向切口向两侧各板层分离1.5mm.之后抽出房水0.2ml,用8-0的可吸收缝线分别在角膜左侧伤口行单纯间断缝合5针,右侧伤口行3针Halsted缝合关闭伤口.术后一个月内抗生素眼水点眼,术后10天拆线.术后1天,3天,5天,7天,10天,14天,21天,30天,90天以及180天为观察时间点,在各个时间点各取10只动物处死, 每个时间点取4只角膜固定后,切片行HE染色以及免疫荧光染色比较两侧伤口VEGF, alpha-SMA, CollagenⅠ以及Collagen Ⅲ的表达情况.

结果 大体观察显示角膜的新生血管于术后第3天开始于角膜上方出现,第14天达到高峰,然后开始逐渐消退,Halsted缝合区伤口的新生血管消退较慢; Halsted缝合区的VEGF呈较强表达;HE染色显示术后14天上皮完全覆盖伤口并呈明显的多层排列形态,术后1个月上皮增殖开始减轻,但术后六个月伤口区上皮仍较正常上皮厚且呈复层排列,在此过程中Halsted缝合区的上皮增殖强于间断缝合区;Halsted缝合区的alpha-SMA阳性表达始于术后7天,而间断缝合区的阳性表达始于术后10天，两侧均在术后21天达到最强,术后1个月表达开始下降,术后6个月仅在血管壁上有表达,在此过程中Halsted缝合伤口区的alpha-SMA表达均强于间断缝合区; Halsted缝合区的Collagen Ⅲ表达在术后第7天开始表达, 而间断缝合区的阳性表达始于术后10天，术后21天两侧均达到最高峰,术后1个月表达开始减退,术后3个月伤口区仍有少量表达,术后6个月完全消失, 在此过程中Halsted缝合伤口区的Collagen Ⅲ表达均强于间断缝合区.而Collagen Ⅰ在术后1个月开始逐渐取代Collagen Ⅲ的存在.

结论 兔角膜板层伤口在组织对位缝合状态下比错位缝合状态下引起较少的新生血管以及较轻的伤口愈合反应,此现象与瘢痕相关因子表达差异有关.