目的 分析靶向封闭髓样细胞诱发受体(TREMs-1)下调小鼠真菌性角膜炎免疫炎症的效能,探讨免疫抑制对真菌性角膜炎的治疗价值。 方法 C57BL/6j小鼠角膜基质注射烟曲霉菌(107U/ml)混悬液2μl构建真菌性角膜炎动物模型,造模成功小鼠随机分为3组,A组(40只),对照组,不做任何处理,B组TREM-1/Fc融合蛋白治疗组(40只),造模前1天小鼠结膜下注射TREM-1/Fc融合蛋白2μg,C组(40)只,融合蛋白阴性对照组,结膜下注射IgG/Fc融合蛋白2μg。造模后1、3、5天对小鼠角膜进行裂隙灯拍照及临床评分,分析角膜浸润严重程度,上述时间点处死小鼠收取角膜进行HE染色,观察角膜组织的损伤情况及角膜内中性粒细胞浸润情况。提取小鼠角膜总RNA, Real-time PCR检测角膜中IL-1β及TNFα的表达规律。提取小鼠角膜总蛋白,ELISA检测角膜中IL-1β及TNFα的表达规律。 结果 造模后各组小鼠角膜第1天均出现角膜浸润,并随时间延长而加重,第5天时A、C组的角膜浸润评分分别为3.4±0.70,3.5±0.65, B组小鼠角膜评分为1.4±0.52,与作为对照的A、C组相比差异具有统计学意义,P <0.01。角膜HE染色显示B组小鼠角膜中炎症细胞浸润数量低于A、C两组。对照组(A、C两组)病变角膜中IL-1β及TNFα的mRNA表达水平在5d达到高峰,分别为159.38108.10, 30.1320.12和145.32±100.70, 35.62±19.63,3.792.60与2.610.79,而治疗组(B组)的表达水平明显降低,为3.792.60与2.610.79,差异有统计学意义,P <0.05。相应的,第5天治疗组(B组)病变角膜中IL-1β及TNFα的蛋白表达水平分别为357.2±143.6pg/mg与38.13±24.18pg/mg,而对照组(A、C两组)的表达水平明显升高,分别为2501.0830.8pg/mg, 276.1±89.73pg/mg和2432.32±862.4pg/mg,305.7±92.13pg/mg,差异有统计学意义,P <0.05。 结论 阻断TREM-1可下调小鼠真菌性角膜炎的炎症反应,减轻角膜组织的损伤程度,为真菌性角膜炎的治疗提供新的免疫学干预模式。
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