目的 通过比较IGF IRα信号通路对同一胚胎时期前脑泡神经干细胞(NSCs)和视杯视网膜干细胞(OC-RSCs)成神经节细胞(RGC)分化特性的影响,分析对IGF IRα在OC-RSCs分化特性决定中的作用。 方法 采用免疫荧光化学染色、Western-blot和流式细胞分析技术,通过研究OC-RSC,向 Thy1.1阳性细胞的分化特性,并通过比较IGF IRα抗体阻断后分化特性的变化,阐明OC-RSCs成RGC分化倾向性的机制。 结果 ⑴在胎牛血清诱导下,OC-RSCs能分化出Thy1.1、PKCα、GFAP阳性细胞,OC-RSCs分化出的比例较高。⑵大鼠E12.5胚胎前脑泡上有部分细胞表达IGF IRα,胚胎视杯细胞全表达IGF IRα。⑶OC细胞在抗体阻断后细胞标志蛋白的表达:IGF IRα阻断后抑制Thy1.1、GFAP和PKCα标志蛋白的表达,而促进rhodopsin蛋白的表达。 结论 IGF IRα受体表达与OC-RSCs的分化特性有关。OC能高分化成Thy1.1阳性细胞, IGF IRα受体的高表达及下游信号通路是OC-RSCs高分化成Thy1.1阳性细胞的重要原因,阻断IGF IRα受体,能抑制OC-RSCs向神经节细胞、Muller细胞、双极细胞方向分化,但能促进OC-RSCs向感光细胞方向分化。膜受体是细胞接受外界信号的接受和整合站,膜受体的阻断可能改变视网膜干细胞分化的方向。 |